欧美日韩视频在线播放I麻豆91在线观看I韩日精品在线I91热爆视频I九九国产视频I好吊色美一区二区三区I黑人毛片91久久久久久I亚洲桃花综合I亚洲超碰在线

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 公司動態NEWS

    您當前的位置:首頁 > 公司動態 > ELISA試劑盒的定性和定量

    ELISA試劑盒的定性和定量

    發布時間: 2015-03-27  點擊次數: 1260次

        ELISA檢測試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術為您解析: 
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。ELISA檢測試劑盒試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。
    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,ELISA檢測試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 黄色日本片 | 五月天网页 | 五月综合 | 国产精品久久久久久久久久新婚 | av在线一级| 综合五月| 中文在线a天堂 | 日韩高清在线一区二区三区 | 国产精品二区三区 | 亚洲精品乱码久久久久久 | 欧美日韩三区二区 | 天堂网在线视频 | 亚洲一二视频 | 五月婷婷狠狠 | 久久污视频 | 欧美一区二区免费在线观看 | av一本久道久久波多野结衣 | 亚洲乱亚洲乱妇 | 亚洲一区二区观看 | 午夜精品福利一区二区三区蜜桃 | 久久精品96 | 欧美激情在线网站 | 亚洲91精品在线观看 | 97人人模人人爽人人少妇 | 国内精品久久久久影院优 | 国产性天天综合网 | av资源免费在线观看 | 五月综合久久 | 日韩在线观看a | 久久精品久久国产 | 日韩激情第一页 | 成人app在线免费观看 | 五月婷婷国产 | 五月色婷 | 久草视频在线免费 | 2000xxx影视| 四虎在线免费观看视频 | 成人免费毛片aaaaaa片 | 色永久免费视频 | 亚洲综合网站在线观看 | 国产综合香蕉五月婷在线 | 黄色亚洲 | 69av视频在线 | 丁香六月五月婷婷 | 黄色av电影在线观看 | 91自拍视频在线 | 综合久久综合久久 | 天天综合网国产 | 蜜臀av在线一区二区三区 | 国产精品一区二区久久精品爱涩 | 亚洲在线a| 日日干天天 | 日韩簧片在线观看 | 狠狠ri | 欧美日韩国产精品久久 | 日本中文字幕在线观看 | 久久成人综合视频 | 欧美男同网站 | 国产精品免费小视频 | 国产精品 国内视频 | 精品国产乱码久久久久久1区二区 | 国内精品视频久久 | 狠狠色丁香婷婷综合久小说久 | 最近日本中文字幕a | 精品九九九九 | 国产99久久久国产精品 | 国产亚洲小视频 | 五月开心综合 | 午夜久久久久久久久久影院 | 中文字幕日本在线观看 | 亚洲永久精品国产 | 日韩在线观看中文字幕 | 伊人影院得得 | 欧美激情第十页 | 综合久久网站 | 中文字幕资源在线 | 五月婷婷六月丁香 | 色综合久久五月天 | 亚洲人视频在线 | 国产精品系列在线观看 | 波多野结衣在线观看一区 | 国产精品久久久久av福利动漫 | 久久激情视频网 | 色婷婷六月天 | 久久不卡电影 | 久久伊人精品一区二区三区 | 欧美三级在线播放 | 婷婷色av| 日本三级久久 | 亚洲禁18久人片 | 91精品视频一区二区三区 | 欧美激情第八页 | 中文av不卡 | 五月婷婷亚洲 | 91免费高清视频 | 日韩三级一区 | 91精品啪在线观看国产线免费 | 三级黄色在线 | 日韩视频在线观看视频 |